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血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。胎牛血清是血清中的一种,是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。) ~; S7 k7 d. e, f4 H( R Y& X+ T. f6 n
B* ?0 |7 L v3 V+ N* F2 O' E胎牛血清的主要作用* |- e; U9 ?" z# v# l5 u8 P6 b
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1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。9 ~* ]- k& ~3 J- |+ a
( U2 y) Z" G7 @! Z2 o2 ^: d2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
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# A9 k8 d# Y, m# k4 ?* v3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。0 D2 V+ @5 { ~
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4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
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5.起酸碱度缓冲液作用。
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. g; \+ n: j. \+ o8 w. j6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
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3 z, K( D0 g! ^$ l5 l+ X2 ]. _0 p胎牛血清的选择4 m$ R' `* T+ n8 Y
( G/ @6 d" T2 @$ Z1.颜色 ?" g' z! M* f3 t& _) M, p1 G$ y$ L
8 K1 [7 y `1 B T5 b! P) W- m根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高度对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程中严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
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* C0 a5 d" V6 S& ?# X' y. L进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。* \2 u5 {5 a+ A
+ Z8 s* _/ E/ o. u总的来说,国产的血清总呈现出蜡黄,进口的血清质量最好的呈现出淡黄、微红色。当然热灭活血清或保存不当的血清,由于红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。" ]3 j. t% W* M8 p k# b
9 O6 S0 Q- }& }9 P+ z; g g2.沉淀
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! K6 L1 G5 i1 i2 i1 `5 U# Q很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。# q6 l3 T x1 D
* k6 F' G, {3 K+ N6 y$ |血清中的沉淀是由纤维蛋白凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。0 y. z/ d6 A8 j( T9 q
) ~2 j1 Y+ g) z2 D* h5 u: h) Q国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生产经过多次冻融,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。. x$ V) T; l& h# Z
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进口的胎牛血清过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中大量纤维蛋白会析出形成沉淀,当然,进口的新生牛血清,一般牛年龄在2周左右,血清中的各种大量纤维蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。
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当然,购买回来的血清都是冷冻状态,使用时需要融化,融化过程最好在温度较低的状态下慢慢融化,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
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3.澄清度
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' k" K- t0 L2 k/ X4 \; [( H" ~( y进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,标签为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。
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